CRISPR 기반 슈퍼박테리아 내성 유전자 타겟팅을 위한 gRNA 라이브러리 구축 기술

본 기술은 광범위한 항생제 내성(AMR)을 가진 슈퍼박테리아의 유전체 내에 존재하는 다양한 항생제 내성 관련 유전자들을 빠르고 체계적으로 찾아내기 위해 CRISPR-Cas9 시스템을 활용하는 접근법입니다.

gRNA 라이브러리 구축 프로세스

• 초고감도 라이브러리 제작: 목표 박테리아 균주의 게놈 전체를 커버할 수 있도록 다양한 가이드 RNA (gRNA) 서열을 포함하는 거대한 cDNA 라이브러리를 설계하고 증폭합니다.
• 스크리닝 및 선별: 제작된 라이브러리를 이용하여 Cas9 시스템과 함께 박테리아에 형질주입한 뒤, 살아남는 박테리아 군집에서 성공적으로 내성 유전자가 잘려나갔는지 확인하는 스크리닝 과정을 수행합니다.

이 방법론은 전통적인 유전체 분석 대비 높은 처리량(High-throughput)을 제공하며, 현재 특정 대학 연구 그룹의 플랫폼 이름 등에서 잠재적인 내성 기전 유전자를 식별하는 데 적용되고 있습니다. 이를 통해 맞춤형 항생제 개발의 기초 자료를 확보할 수 있으며, 유전자 가위 기술의 실질적인 임상/진단 응용 예시로 주목받고 있습니다.